产品货号：
BTN11-1770
中文名称：
O型\A型\Asia1型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR检测试剂盒
英文名称：
Serotype O,A and Asia 1 FMDV RT-PCR Kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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口蹄疫是由口蹄疫病毒（FMDV）引起的多种偶蹄动物高度接触性传染病。口蹄疫病毒属于小核糖核酸病毒科口蹄疫病毒属，病毒基因组为单股正链RNA，约含8500个核苷酸。目前已知该病毒有7个血清型，分别为O、A、C、Asia1、SAT1、SAT2和SAT3，每种血清型包括多个亚型，各型之间无交叉保护。我国及周边国家流行O型、A型和Asia1型3种血清的FMDV，对FMDV进行准确定型和遗传变异分析，是FMD疫苗选择和防控措施制定的重要依据。为此，本公司建立了一种能扩增O型、A型和Asia1型3种血清型FMDV的通用RT-nPCR方法，灵敏度高，特异性强。
产品特点：
1. 通用性强，可用于O型、A型和Asia1型3种血清型FMDV的定性鉴定检测和分子流行病学调查。
2. 能对样品中FMDV进行快速检测，具有良好的特异性和敏感性。
3. 结合扩增产物的克隆测序技术，可对FMDV进行准确分型。
4. 使用一管式RT-PCR试剂盒，减少了操作步骤，降低了操作误差。
产品组成：
保存条件：-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一、样品RNA的制备
用自选方法纯化FMDV样品的RNA，也可以另购本公司的一管式病毒RAN提取试剂盒(BTN3073)或柱式病毒RNA(BTN71001)提取试剂盒，上述两款产品跟本试剂盒兼容。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
三、设置RT-nPCR反应
(一) 第一次RT-PCR：
3. 在PCR管中加入下列成分(30μl体系)：
4. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行RT-PCR：
5. 电泳检测RT-PCR产物。预期的PCR产物长度为1187 bp。
(二) 第二次PCR：
6. 在PCR管中加入下列成分(25μl体系)：
7. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行PCR：
8. 电泳检测PCR产物。预期的PCR产物长度为996bp。
相关搜索：O型\A型\Asia1型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR检测试剂盒，Serotype O,A and Asia 1 FMDV RT-PCR Kit
产品特点：
1. 通用性强，可用于O型、A型和Asia1型3种血清型FMDV的定性鉴定检测和分子流行病学调查。
2. 能对样品中FMDV进行快速检测，具有良好的特异性和敏感性。
3. 结合扩增产物的克隆测序技术，可对FMDV进行准确分型。
4. 使用一管式RT-PCR试剂盒，减少了操作步骤，降低了操作误差。
产品组成：
| 组分 | 编号 | 规格 |
| 双酶一管式RT-PCR Buffer，2× | BTN91202A | 750 μL |
| MMLV-Taq Mix | BTN91202B | 100 μL |
| 即用型PCR Mix 3.0 | BTN90805 | 1.5mL |
| 通用FMDV专一性引物对一 | yw13151316 | 100 μL |
| 通用FMDV专一性引物对二 | yw13171318 | 100 μL |
| 通用FMDV阳性对照 | yw13191320 | 50 μL |
| 超纯水 | BTN100935 | 1mL |
保存条件：-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一、样品RNA的制备
用自选方法纯化FMDV样品的RNA，也可以另购本公司的一管式病毒RAN提取试剂盒(BTN3073)或柱式病毒RNA(BTN71001)提取试剂盒，上述两款产品跟本试剂盒兼容。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
三、设置RT-nPCR反应
(一) 第一次RT-PCR：
3. 在PCR管中加入下列成分(30μl体系)：
| 成 份 | 样品 | 阳性对照 | 阴性对照 |
| 双酶一管式RT-PCR Buffer，2× | 15μl | 15μl | 15μl |
| 通用FMDV专一性引物对一 | 2μl | 2μl | 2μl |
| 样品RNA | 1-5μl | 无 | 无 |
| 通用FMDV阳性对照 | 无 | 2μl | 无 |
| 补超纯水到 | 28μl | 28μl | 28μl |
| MMLV-Taq Mix | 2μl | 2μl | 2μl |
4. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行RT-PCR：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 逆转录 | 60℃ | 30分钟 |
| 预变性 | 95℃ | 5分钟 |
| PCR反应 (30个循环) | 94℃ | 30s |
| 58℃ | 40s | |
| 72℃ | 1分钟 | |
| 延伸 | 72℃ | 5分钟 |
5. 电泳检测RT-PCR产物。预期的PCR产物长度为1187 bp。
(二) 第二次PCR：
6. 在PCR管中加入下列成分(25μl体系)：
| 成 份 | 样品 | 阳性对照 | 阴性对照 |
| 通用FMDV专一性引物对二 | 2μl | 2μl | 2μl |
| 第一次RT-PCR产物 | 1-2uL | 无 | 无 |
| 通用FMDV阳性对照 | 无 | 2μl | 无 |
| 补超纯水到 | 12.5μl | 12.5μl | 12.5uL |
| 即用型PCR Mix 3.0 | 12.5uL | 12.5uL | 12.5uL |
7. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行PCR：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 3分钟 |
| PCR反应 (30个循环) | 94℃ | 30s |
| 58℃ | 40s | |
| 65℃ | 1分钟 | |
| 延伸 | 65℃ | 5分钟 |
8. 电泳检测PCR产物。预期的PCR产物长度为996bp。
相关搜索：O型\A型\Asia1型口蹄疫病毒通用套式RT-PCR检测试剂盒，Serotype O,A and Asia 1 FMDV RT-PCR Kit